Περί Gram – θετικών κόκκων…

Οι σημαντικότεροι Gram (+) κόκκοι που προκαλούν νόσο στον άνθρωπο ανήκουν στα γένη Staphylococcus, Streptococcus  και Enterococcus. Οι σταφυλόκοκκοι και οι στρεπτόκοκκοι είναι μικρόβια ΕΞΑΙΡΕΤΙΚΑ ΜΕΓΑΛΗΣ ιατρικής σημασίας.

Όλοι βάφονται Gram-θετικοί (μωβ) στη Gram χρώση. Πώς τους διακρίνουμε μεταξύ τους στο εργαστήριο;

  • Διάταξη στα κλινικά παρασκευάσματα. Στη μικροσκόπηση του παρασκευάσματος με Gram χρώση, οι σταφυλόκοκκοι διατάσσονται συνήθως σε ομάδες ακανόνιστες σα σταφύλια ενώ οι στρεπτόκοκκοι σε ζεύγη ή αλυσίδες.
  • Αντίδραση καταλάσης. Η καταλάση είναι ένζυμο που διασπά το H2O2 σε νερό και Ο2.
    ΟΛΟΙ οι σταφυλόκοκκοι διαθέτουν το ένζυμο και δίνουν θετική αντίδραση καταλάσης και ΚΑΝΕΝΑΣ στρεπτόκοκκος δε διαθέτει το ένζυμο άρα όλοι οι στρεπτόκοκκοι και οι εντερόκοκκοι δίνουν αρνητική αντίδραση καταλάσης.
Εναιωρούμε μέρος της αποικίας του υπό έλεγχον μικροβίου σε διάλυμα Η2Ο2 3%. Επί παρουσίας καταλάσης, το Ο2 απελευθερώνεται ως φυσαλίδες (θετική δοκιμασία).

Οι σταφυλόκοκκοι που προσβάλλουν τον άνθρωπο ανήκουν σε 2 ομάδες, που διακρίνονται μεταξύ τους ανάλογα με το αν διαθέτουν το ένζυμο κοαγκουλάση, το οποίο προκαλεί πήξη του πλάσματος, μετατρέποντας το ινωδογόνο σε ινική. Στη μία ομάδα ανήκει ο Staphylococcus aureus που είναι κοαγκουλάση θετικός και στην άλλη οι κοαγκουλάση-αρνητικοί σταφυλόκοκκοι, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus saprophyticus, Staphylococcus lugdunensis, Staphylococcus hemolyticus και πολλοί άλλοι.

Η αντίδραση κοαγκουλάσης μπορεί να γίνει σε πλάκα ή σε σωληνάριο. Ο σχηματισμός συσσωματωμάτων ινικής (στην πλάκα) – ανίχνευση συνδεδεμένης κοαγκουλάσης- ή η πήξη του πλάσματος στο σωληνάριο – ανίχνευση ελεύθερης κοαγκουλάσης.

Δοκιμασίες που χρησιμοποιούνται διαγνωστικά στο εργαστήριο για τους διάφορους Gram-θετικούς κόκκους.

  • ανίχνευση καταλάσης – διάκριση σταφυλοκόκκων από στρεπτοκόκκους
  • ανίχνευση κοαγκουλάσης (πηκτάσης) – διάκριση S.aureus από κοαγκουλάση-αρνητικούς σταφυλοκόκκους
  • ανίχνευση DNAάσης – διάκριση S.aureus από κοαγκουλάση-αρνητικούς σταφυλοκόκκους
  • ζύμωση μαννιτόλης διάκριση S.aureus από κοαγκουλάση-αρνητικούς σταφυλοκόκκους
  • ευαισθησία στη νοβοβιοκίνη – διάκριση S. epidermidis από S.saprophyticus
  • ευαισθησία στη βακιτρακίνη – ταυτοποίηση Streptococcus pyogenes
  • CAMP – ταυτοποίηση Streptococcus agalactiae
  • υδρόλυση ιππουρικού – ταυτοποίηση Streptococcus agalactiae
  • ευαισθησία στην οπτοχίνη – ταυτοποίηση Streptococcus pneumoniae
  • διαλυτότητα στα χολικά άλατα – ταυτοποίηση Streptococcus pneumoniae
  • αντίδραση εξοίδησης ελύτρου – ταυτοποίηση Streptococcus pneumoniae
  • υδρόλυση εσκουλίνης παρουσία χολής – ταυτοποίηση Enterococcus και στρεπτοκόκκων ομάδας D

Θα αρχίσουμε με το Σταφυλόκοκκο. Διαλέξτε και πάρτε από το there is no spoon Murray, Levinson, Greeenwood και για κουλτούρα Schaechter’s.

AADNYK1vVux7TpLYmiJeXPoPa?dl=0

Leave a Reply

Your email address will not be published. Required fields are marked *